中國藥品檢驗標準操作規(guī)范2010版滲透壓摩爾濃度

1. 主題內(nèi)容和適用范圍

本程序規(guī)定了滲透壓摩爾濃度的測定方法和注意事項，使其規(guī)范化、標準化，并描述了更改信息。
本程序適用于滲透壓摩爾濃度的測定法的操作。
 

2. 引用標準

中國藥典 2010 年版二部附錄Ⅸ G “滲透壓摩爾濃度測定法”、中國藥品檢驗標準 操作規(guī)范 2010 年版 P262“滲透壓摩爾濃度測定法”。
 

3. 簡介

生物膜，例如人體的細胞膜或毛細管壁，一般具有半透膜的性質(zhì)，溶劑通過半透膜由低濃度溶液向高濃度溶液擴散的現(xiàn)象稱為滲透，阻止?jié)B透所需施加的壓力，即為滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）。在涉及溶質(zhì)的擴散或通過生物膜的液體轉(zhuǎn)運各種生物過程中，滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）都起著及其重要的作用。因此，在制備注射劑、液體型滴眼液等藥物制劑時，必須關(guān)注其滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）。凡處方中添加了滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）調(diào)節(jié)劑的制劑，均應控制其滲透壓摩爾濃度。
 
靜脈輸液、營養(yǎng)液、電解質(zhì)或滲透利尿藥（如甘露醇注射液）等制劑，應在藥品說明書上表明其滲透壓摩爾濃度，以便臨床醫(yī)生根據(jù)實際需要對所用制劑進行適當?shù)奶幹�。正常人體血液的滲透壓摩爾濃度范圍為 285～310mOsom/kg，0.9%氯化鈉溶液或 5% 葡萄糖溶液的滲透壓摩爾濃度與人體血液相當。雖然人體本身具有一定的滲透壓調(diào)節(jié)能力，但靜脈輸液、眼用溶液應盡可能與血液等滲。 除另有規(guī)定外，等滲的范圍一般為260～320mOsmol/kg；冰點下降0.48～0.59℃或滲透壓比0.9～1.1.甘露醇注射液、氨基酸注射液等高滲注射劑及注射用無菌粉末滲透壓摩爾濃度的限值，可根據(jù)生產(chǎn)工藝及臨床使用情況做出相應的規(guī)定。
 

4. 滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）與滲透壓摩爾濃度

溶液的滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓），依賴于溶液中粒子的數(shù)量，是溶液的依數(shù)性之一，通常以滲透壓摩爾濃度（Osmolality）來表示，它反映的是溶液中各種溶質(zhì)對溶液滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）貢獻的總和。滲透壓摩爾濃度的單位，通常以每千克溶劑中溶質(zhì)的毫滲透壓摩爾來表示，可按下列公式計算毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：
 
毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）=（每千克溶劑中溶解的溶質(zhì)克數(shù)/分子量）×n× 1000
式中，n 為一個溶質(zhì)分子溶解并解離時形成的粒子數(shù)。在理想溶液中，例如葡萄糖 n=1，氯化鈉或硫酸鎂n=2，氯化鈣n=3，枸櫞酸鈉 n=4。
 
在生理范圍及稀溶液中，其滲透壓摩爾濃度與理想狀態(tài)下的計算值偏差較��；隨著溶液濃度的增加，與計算值比較，實際滲透壓摩爾濃度。例如 0.9%氯化鈉注射液，按上式計算，毫滲透壓摩爾濃度是2×1000×9/58.4=308mOsmol/kg， 而實際上在此溶度時氯化鈉溶液的n 稍小于2，其實際測得值是286mOsmol/kg；這是由于在此濃度條件下，一個氯化鈉分子解離所形成的二個離子會發(fā)生某種程度的締合，使有效離子數(shù)減少的緣故。復雜混合物（如水解蛋白注射液）的理論滲透壓摩爾濃度不容易計算，因此通常采用實際測定值表示。
 
理想的稀溶液具有四個依數(shù)性質(zhì)，即滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）、沸點上升、冰點下降和蒸氣壓下降。所謂依數(shù)性，是指其性質(zhì)決定于溶質(zhì)的粒子數(shù)而與溶質(zhì)本身無關(guān)。這四個依數(shù)性質(zhì)均與溶液的重量摩爾濃度成正比。通常采用測量溶液的冰點下降來間接測定其滲透壓摩爾濃度。在理想的稀溶液中，冰點下降符合ΔTf=Kf•m的關(guān)系，式中，ΔTf為冰點下降值，Kf為冰點下降常數(shù)（當水為溶劑時為1.86），m為重量摩爾濃度。而滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）符合P0=K0•m的關(guān)系，式中，P0為滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓），K0為滲透壓常數(shù)，m為溶液的重量摩爾濃度。由于兩式中的濃度等同，故可以用冰點下降法測定溶液的滲透壓摩爾濃度。
 

5. 滲透壓摩爾濃度測定儀（又稱滲透壓儀，滲透壓測定儀，摩爾濃度滲透壓儀）

采用冰點下降的原理設計的滲透壓摩爾濃度測定儀（又稱滲透壓儀，滲透壓測定儀，摩爾濃度滲透壓儀）通常由制冷系統(tǒng)、用來測定電流或電位差的熱敏探頭和振蕩器（或金屬探針）組成。測定時將測定探頭進入供試溶液的中心，并降至儀器的冷卻槽中。啟動制冷系統(tǒng)，當供試溶液的溫度降至凝固點以下時， 滲透壓儀采用振蕩器（或金屬探針）誘導溶液結(jié)冰，自動記錄冰點下降的溫度。滲透壓儀（滲透壓摩爾濃度測定儀，滲透壓測定儀，摩爾濃度滲透壓儀）顯示的測定值可以是冰點下降的溫度，也可以是滲透壓摩爾濃度。
 

6. 操作程序

6.1 滲透壓摩爾濃度測定
6.1.1 標準溶液的制備
取基準氯化鈉試劑，于 500～650℃干燥 40～50min，置干燥器（硅膠）中防冷至室溫。根據(jù)需要，按表 1 所列數(shù)據(jù)精密稱取適量，溶于 1kg 水中，搖勻。

表1 滲透壓摩爾濃度測定儀校正用標準溶液

每 1kg 水中氯化鈉的重量（g）	毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）	冰點下降溫度 ΔT（℃）
3.087	100	0.186
6.260	200	0.372
9.463	300	0.558
12.684	400	0.744
15.916	500	0.930
19.147	600	1.116
22.380	700	1.302

6.1.2 供試品溶液的制備
供試品如為液體，通常可直接測定，但如其滲透壓摩爾濃度大于 700mOsmol/kg 或為濃溶液，可用適宜的溶劑（通常為注射用水）稀釋至表中測 定范圍內(nèi)；如為固體（如注射用無菌粉末），可采用藥品標簽或說明書中的規(guī)定溶劑溶 解并稀釋至上表測定范圍內(nèi)。需特別注意的是，溶液經(jīng)稀釋后，粒子間的相互作用于原溶液有所不同，一般不能簡單地將稀釋后溶液滲透壓（摩爾濃度滲透壓，摩爾滲透壓）的測定值乘以稀釋倍數(shù)來計算原溶 液的滲透壓摩爾濃度。例如，甘露醇注射液、氨基酸注射液等高滲溶液和注射用無菌粉 末可用適宜的溶劑（如注射用水、5%葡萄糖注射液或 0.9%氯化鈉注射液等）經(jīng)溶解、稀 釋后測定，并按照正文品種各論項下規(guī)定具體的溶解或稀釋方法。
 
6.1.3 測定法
按儀器說明書操作，首先取適量新沸防冷的水調(diào)節(jié)儀器零點，然后由表中選擇兩種標準溶液校正儀器，再測定供試品溶液的滲透壓摩爾濃度比或冰點下降值。注：（供試品溶液的滲透壓摩爾濃度比應介于兩種標準溶液之間；0～100mOsmol/kg 在測定范圍內(nèi)，水（0 mOsmol/kg）可以作為一個標準溶液的使用）。
 
6.2 滲透壓摩爾濃度比的測定
供試品溶液與 0.9% （g/ml）氯化鈉標準溶液的滲透壓摩爾濃度比率稱為毫滲透壓摩爾濃度比。用滲透壓摩爾濃度測定儀分別測得供試品溶液與0.9%（g/ml）氯化鈉標準溶液的滲透壓摩爾濃度OT 與OS，方法同 4.3。并用下列公式計算滲透壓摩爾濃度比：
滲透壓摩爾濃度比=OT/OS
 
毫滲透壓摩爾濃度比的測定用標準溶液的制備
精密稱取經(jīng)500～650℃干燥40～50min并置干燥器 （硅膠） 中放冷的基準氯化鈉 0.900g，加水使溶解并稀釋至 100ml，搖勻。
 

7. 注意事項

7.1 為了使測定結(jié)果準確并有良好的重現(xiàn)性，應按各儀器說明書規(guī)定的取樣體積準確取樣至測定管中，避免測定溶液中存在氣泡。在每次測定后應用水清洗熱敏探頭并用濾紙吸干。
 
7.2 如重復測定一份樣品，需重新取樣至另一干凈的測定管中，因為降至冰點再融化的溶液， 溶質(zhì)可能已不是均勻分布于溶劑中， 易導致過早結(jié)晶， 影響測定結(jié)果的重現(xiàn)性。
 

8. 更改信息